激光顯微鏡的原理及特點(diǎn)

更新時(shí)間：2022-05-17

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傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡使用的是場光源，標(biāo)本上每一點(diǎn)的圖像都會(huì)受到鄰近點(diǎn)的衍射或散射光的干擾；激光顯微鏡利用激光束經(jīng)照明針孔形成點(diǎn)光源對(duì)標(biāo)本內(nèi)焦平面的每一點(diǎn)掃描，標(biāo)本上的被照射點(diǎn)，在探測針孔處成像，由探測針孔后的光點(diǎn)倍增管或冷電耦器件逐點(diǎn)或逐線接收，迅速在計(jì)算機(jī)監(jiān)視器屏幕上形成熒光圖像。照明針孔與探測針孔相對(duì)于物鏡焦平面是共軛的，焦平面上的點(diǎn)同時(shí)聚焦于照明針孔和發(fā)射針孔，焦平面以外的點(diǎn)不會(huì)在探測針孔處成像，這樣得到的共聚焦圖像是標(biāo)本的光學(xué)橫斷面，克服了普通顯微鏡圖像模糊的缺點(diǎn)。

激光顯微鏡的特點(diǎn)：

1、對(duì)活細(xì)胞和組織或細(xì)胞切片進(jìn)行連續(xù)掃描，可獲得精細(xì)的細(xì)胞骨架、染色體、細(xì)胞器和細(xì)胞膜系統(tǒng)的三維圖像。

2、可以得到比普通熒光顯微鏡更高對(duì)比度、高解析度圖像、同時(shí)具有高靈度、杰出樣品保護(hù)。

3、多維圖像的獲得，時(shí)間序列掃描旋轉(zhuǎn)掃描、區(qū)域掃描、光譜掃描、同時(shí)方便進(jìn)行圖像處理。

4、細(xì)胞內(nèi)離子熒光標(biāo)記，單標(biāo)記或多標(biāo)記，檢測細(xì)胞內(nèi)如PH和鈉、鈣、鎂等離子濃度的比率測定及動(dòng)態(tài)變化。

5、熒光標(biāo)記探頭標(biāo)記的活細(xì)胞或切片標(biāo)本的活細(xì)胞生物物質(zhì)，膜標(biāo)記、免疫物質(zhì)、免疫反應(yīng)、受體或配體，核酸等觀察；可以在同一張樣品上進(jìn)行同時(shí)多重物質(zhì)標(biāo)記，同時(shí)觀察；

6、對(duì)細(xì)胞檢測無損傷、精確、準(zhǔn)確、可靠和優(yōu)良重復(fù)性；數(shù)據(jù)圖像可及時(shí)輸出或長期儲(chǔ)存。

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